HEPES緩沖鹽溶液：是一種常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染溶液，主要由HEPES、氯化鈉、磷酸鹽等組成，其最適pH值為7.05～7.12，經(jīng)過濾除菌處理；影響磷酸鈣轉(zhuǎn)染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA在細(xì)胞上停留的時間、休克時間；2×HeBS要求DNA濃度在10～50μg為宜，Hela、BALB等細(xì)胞沉淀放置16h，CHO、DUKX、BⅡ等細(xì)胞可以通過甘油、DMSO進(jìn)行熱休克處理以提高轉(zhuǎn)染效率。

【產(chǎn)品規(guī)格】 ：100ml                          

【儲存條件】 ：-20℃保存                      

【有效期】 ：1年

本產(chǎn)品僅供科研實驗用，不做其它用途！

【主要成分】 ：

主要由HEPES.氯化鈉、磷酸鹽、去離子水等組成,經(jīng)過濾除菌。

【注意事項】 ：

1、注意無菌操作 ,盡量避免污染。

2、加入2xHeBS(pH7.05) 500ul到上述含有DNA的500μl溶液后,應(yīng)在1～2min內(nèi)加入到細(xì)胞中,時間間隔不宜過久,以免影響轉(zhuǎn)染效果。

3、轉(zhuǎn)染 12～24h后,可以加入終濃度為10mmol/L的J酸鈉溶液,可以提高病毒滴度。

4、收集病毒. 上清時,可以每隔12h收集-次,但同時應(yīng)補足培養(yǎng)液。這種情況下,病毒滴度沒有明顯下降。

5、 4℃ 500g離心5min收集上清目的在于去除活細(xì)胞。

6、該試劑用于轉(zhuǎn)染時,應(yīng)檢測其轉(zhuǎn)染效率,好的轉(zhuǎn)染效率應(yīng)介于30～60%之間。

7、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一-次性手套操作。

HEPES緩沖鹽溶液