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標(biāo)題《人顆粒蛋白A的表達(dá)、優(yōu)化及抗腫瘤活性研究》

摘要：為了探究人顆粒蛋白A(HGRNA)的抗腫瘤活性,克隆HGRNA并轉(zhuǎn)入畢赤酵母發(fā)酵表達(dá),蛋白用Ni2+構(gòu)成的金屬螯合親和層析柱(MCAC)純化。根據(jù)培養(yǎng)畢赤酵母菌落的條件,利用響應(yīng)面分析法優(yōu)化并確定出畢赤酵母的最優(yōu)發(fā)酵條件:通氣量0.13 m L×min-1、豆粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.6%、發(fā)酵溫度24.5℃、發(fā)酵初始pH 6.6。利用MTT法分析HGRNA的抗腫瘤作用,結(jié)果表明對(duì)人腎細(xì)胞293T無(wú)細(xì)胞毒性,對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480、人胰腺癌細(xì)胞SW1990、人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549有明顯的抑制作用,IC50值分別約為89.7、106.2、100.8μg×mL-1,且抑制效果呈劑量依賴型。結(jié)果表明HGRNA具有作為新型抗癌藥的潛力。

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