谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)試劑盒不同樣本的檢測(cè)方法
產(chǎn)品說(shuō)明：
GOT（ 2.6.1.1）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化可逆轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，是氨基
酸代謝的重要酶。此外，GOT 在心肌細(xì)胞中含量zui高，上一般常作為心肌梗塞和心肌炎的輔助檢查。肝臟損害時(shí)其血清濃度也可升高。
GOT 催化 α-酮戊二酸和天門(mén)東氨酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，生成谷氨酸和草酰乙酸，草酰乙酸進(jìn)一
步自行脫羧生成丙酮酸；丙酮酸可與 2,4-*肼反應(yīng)生成 2,4-*腙，在堿性條件下顯棕紅色；測(cè)定 505nm 吸光度的變化，即可計(jì)算 GOT 酶活力。
試驗(yàn)需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣品測(cè)定的準(zhǔn)備
1、 細(xì)胞或細(xì)菌樣品的制備 ：
先收集細(xì)胞或細(xì)菌樣品到離心管內(nèi)，棄上清，按照每 500 萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率 20％，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）。3500g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、組織：
稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液進(jìn)冰浴行勻漿。3500g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
3、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
谷草轉(zhuǎn)氨酶要分布在心肌，其次是肝臟、骨骼肌和腎臟等組織中。正常時(shí)血清中的AST含量較低，但相應(yīng)細(xì)胞受損時(shí)，細(xì)胞膜通透性增加，胞漿內(nèi)的AST釋放入血，故其血清濃度可升高，一般常作為心肌梗死和心肌炎的輔助檢查。谷草轉(zhuǎn)氨酶的正常值為0～40單位/升，當(dāng)谷草轉(zhuǎn)氨酶明顯升高，谷草轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）大于1時(shí)，提示有肝實(shí)質(zhì)的廣泛損害，預(yù)后不良。
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